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灭菌后小导管内留有气泡的缘由分析及其处理方法

时间: 2023-12-03 来源: 乐鱼app体育官方正版下载

  大肠菌群(大肠杆菌)检测实验培养基(LST肉汤)灭菌时,偶尔会有小气泡留在小导管内,导致培养基不可以使用。重复灭菌不仅费时费电,还会破坏培养基的成分。为了尽最大可能避免问题的发生,根据实验经验和严密思考做出几种缘由分析,并给予解决的办法。

  当灭菌锅压力表示数为0而温度表示数还高与室温时,别打开灭菌锅。因为打开锅盖瞬间,锅内大量热量散出,温度突然降低,试管内温度也随着降低,导致管内气减小,沸点降低,部分水会汽化留在小导管内。

  解决办法:等灭菌锅内气压和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。

  试管塞塞得太紧在灭菌时会导致试管内与灭菌锅内压力不一致。在灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于管内压力;灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力。锅内压力会大于管内压力时,试管内压力不够,不能将小导管内气体排尽,就留有气泡;锅内压力小于管内压力时,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。

  我们可以把一根毛细管一端封口,另一端水里,毛细管里怎么都不会进水。同样把一个烧杯倒扣进水里就很容易进水了。小导管在加压后一方面水要进去,另外里面的空气要出来,如果口太小的话,空气不容易出去,水也不容易进来,就会导致气泡六在里面了。

  由培养基质量引起的气体不能排尽或培养基含有高温度高压力分解产气的成分。灭菌时用水做培养基组的对照试验,若培养基组有气泡,而对照组没有气泡,可确定是有此原因引起。

  灭菌锅最大压力不够不能使管内液体强行把气体挤出,最后还留有小气泡,还会使温度上升缓慢,或达不到灭菌温度。此原因的可能性较小,我们大家可以在排除原因一、二、三、四的情况下,用不加试管塞、大口导管做试验,若还仍不能够达到效果,就要检查灭菌锅了。

  注意事项:① * 为根本原因。②不要将试管倒置,以免试管口和试管塞受培养基污染。

  1.可以在高压锅压力降下来后,温度不太高的时候将培养基从锅中拿出,迅速放在冷水中,急冷,注意要使冷水高度超过试管中液面高度。利用热胀冷缩的原理,可以使小倒管中气泡排出。

  2.若使用非全自动高温度高压力灭菌锅(此类锅通常要在100℃手动关闭放气阀),则不要在锅刚达到100℃时就关闭放气阀,可以让高压锅在100℃时多排一会儿热气,这样有助于小倒管中气体排出。

  此外,最好还是不要采用将灭菌后的试管颠倒或大角度倾斜的方式,使小倒管内气体排出。此种方法可能会导致培养基通过试管口或试管塞受到污染,或者导致试管内液体流出。

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